三分钟，了解猪乙脑疫苗的那些事

　　据央视网年9月5日消息，5日中国驻新加坡大使馆接新加坡卫生部通报，截止到当日中午12时，共有30名中国公民在新加坡感染寨卡病毒。寨卡病毒感染者中，只有约20%会表现轻微症状，典型的症状包括急性起病的低热、斑丘疹、关节疼痛（主要累及手、足小关节）、结膜炎，其他症状包括肌痛、头痛、眼眶痛及无力。另据国外研究显示，孕妇若感染寨卡，约1%至13%的胎儿会出现小头畸形症。中国疾病预防控制中心专家日前表示，随着周边国家近期发生的寨卡病毒疫情，目前我国存在输入寨卡病毒疫情的风险。由于尚无针对寨卡病毒的相关药物和疫苗，如果到有寨卡流行的国家旅行，一定注意防蚊！看到以上这则新闻，小编不禁想起了寨卡病毒的一个近亲——流行性乙型脑炎病毒，寨卡病毒与乙脑病毒同属黄病毒科，黄病毒属，均为单股正链RNA病毒，以蚊虫为主要传播媒介，发病具有季节性，在蚊虫滋生的7-9月为发病高峰期。而乙脑同时也是严重危害养猪业的重大疫病之一，可引起猪的繁殖障碍性疾病，如妊娠母猪发生流产、死胎和木乃伊胎（图1），公猪发生睾丸炎，新生仔猪发生脑炎（图2），育肥猪持续高热，给养猪业带来了巨大的经济损失。（图片来源于网络）图1图2目前尚无治疗乙脑的特效方法，主要通过控制蚊虫传播和免疫接种来防控，而控制蚊虫在我国有一定的难度，因此疫苗接种成为控制乙脑流行的最有效方法，文章主要对猪乙型脑炎疫苗的研究现状进行综述。

1、传统疫苗

鼠脑纯化灭活疫苗和地鼠肾细胞减毒活疫苗是目前国内外广泛应用的常规疫苗。鼠脑灭活疫苗主要应用于国外，地鼠肾细胞减毒活疫苗在国内应用。

1.1鼠脑灭活疫苗日本于年研制出鼠脑灭活疫苗，该疫苗是目前唯一获得WHO批准并商品化的人用乙型脑炎疫苗，该疫苗在泰国、印度、越南、朝鲜和马来西亚等乙型脑炎高度流行的国家应用之后，乙型脑炎的感染率显著下降。该疫苗接种猪也能产生良好的保护作用，尤其是对青年妊娠母猪和公猪的安全性好，免疫接种后不会产生病毒血症、胎内感染等不良反应，对母猪感染猪乙型脑炎后引起的繁殖障碍症状保护率高，但该疫苗存在价格昂贵，免疫剂量大等缺陷。1.2地鼠肾细胞减毒活疫苗该疫苗采用减毒株SA14-14-2，具有毒力低、抗原性强的优点，能激发较强的特异性免疫反应。初产母猪接种该疫苗后能抵抗JEV强毒的攻击，不产生病毒血症，对胎儿保护率可达%，对后备母猪也能产生良好的免疫保护作用。版《中国兽药典》已收入该疫苗的质量标准。

2、新型疫苗

近年来，乙脑病毒的分子生物学特征研究进一步深入，因此开发乙脑的新型疫苗成为近十几年乙脑的研究重点。

2.1亚单位疫苗亚单位疫苗是将病原体的抗原基因与表达载体连接后转入宿主细胞，在宿主细胞内表达具有抗原性的蛋白，经抽提纯化后制成疫苗，该疫苗只含有病原体的一部分，不会引起动物发病，安全性较高。E蛋白是乙脑病毒主要的抗原蛋白，可诱导机体产生中和抗体，因此一般通过表达JEV的E基因来制备亚单位疫苗。目前，我公司的研发人员将JEV的E基因插入杆状病毒表达载体构建重组杆状病毒，并利用重组杆状病毒表达的E蛋白免疫小鼠和猪，结果表明表达的E蛋白可刺激小鼠和猪产生中和抗体，保护其免受JEV的攻击。2.2核酸疫苗核酸疫苗又称DNA疫苗，是将抗原基因转入真核表达载体，并将重组载体导入动物体内，在宿主细胞的表达系统中合成抗原蛋白，从而使宿主的免疫系统识别抗原并诱导产生对该抗原的免疫应答。研究者构建了含病毒PrM与E基因的重组质粒，免疫动物后刺激机体同时产生特异性的CTL细胞免疫反应及体液免疫反应，并且中和抗体的效价和维持时间都高于普通灭活疫苗，说明核酸疫苗在预防乙脑感染方面具有可行性。2.3重组活载体疫苗

重组活载体嵌合疫苗是通过将外源目的基因连接或替换到活病毒载体中，以基因工程手段改造病原体基因组，从而构建表达多种不同病原体抗原基因的重组病毒。这种技术是利用一些基因组较大的病毒载体，在其基因组中插入多种其它病毒的抗原基因，使用这种嵌合病毒免疫动物可以保护其免受多种病原体侵害。目前用作“疫苗模式”的病毒载体有黄热病毒YF17D疫苗株、痘病毒（哥本哈根株(NYVAC)、金丝雀株(ALVAC)和MVA株）。

赛诺菲巴斯德公司将减毒株（SA14-14-2）的PrM和E基因转入YF17D疫苗株黄热病毒载体，构建得到黄热-乙脑嵌合病毒。该疫苗经三期临床试验证明，安全性优于鼠脑灭活疫苗，一次单剂量接种血清抗体转阳率高达99.1%。目前该疫苗已经在澳大利亚注册成功。

3、乙型脑炎疫苗国内应用现状：

鉴于流行性乙型脑炎病毒是重要的人畜共患病原，世界卫生组织已经把乙型脑炎疫苗确定为首要研究和开发的项目之一，猪乙型脑炎疫苗的研究也成为动物保健领域的研究热点，但目前国内用于临床的仍只有地鼠肾细胞减毒活疫苗。而此类疫苗为我公司于年在国内第一个获得一类新兽药证书，填补了业内空白。我们采用原代地鼠肾细胞传代技术、乳鼠皮下传代技术和蚀斑纯化技术相结合的选育模式，获得了最合适猪用的乙型脑炎减毒株，该毒株毒力高度致弱，经乳猪多次传代后毒力不返强，毒价稳定，免疫效力高，免疫期长，可对猪群产生长时间的安全稳定保护。

针对乙脑疫苗免疫应答的特点，我们开发了乙脑活疫苗专用稀释液，添加了专利产品——胞肽和抗过敏因子，有效降低了疫苗的免疫副反应，增强接种猪只的免疫力，切实提高了疫苗的免疫效果。产品上市以来，我们对全国数十个省市的部分猪场共计约50万余头种公母猪进行了跟踪试验，结果表明，繁殖猪群接种乙脑活疫苗能够有效地产生免疫力，抵御乙脑强毒感染，降低妊娠猪流产、死胎及预防公猪睾丸炎，市场占有率达60%以上，成为养殖户最受欢迎的产品。

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