乙型肝炎病毒DNA定量检测室内质控品的制

乙型肝炎病毒DNA定量检测室内质控品的制备及效果评价

摘要：

目的制备乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)DNA定量检测室内质控品,并进行初步评价。

方法

对HBV各个基因型序列进行多序列比对分析,选择保守序列S区设计引物,PCR扩增HBVS区基因,与pEASY-T1载体连接,构建重组质粒。测序后,将重组质粒稀释成10~7copies/ml、10~4copies/ml两个水平,分别作为高值质控品(HBVH)和低值质控品(HBV-L),分装冷冻于-80℃,并初定靶值。评价自制质控品的精密度和稳定性,绘制室内质控图。

结果构建的重组质粒测序结果与目的片段一致,自制HBVDNA2个水平室内质控品的精密度、稳定性均达到实验要求。

结论自制HBVDNA2个水平的质控品可用于HBVDNA定量检测的室内质控。

关键词：乙型肝炎病毒;核酸;荧光定量PCR;室内质控品