贝克曼化学发光测定的影响因素之钩状效应

钩状效应即HOOK效应,是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象，其中抗体过量叫做前带效应；抗原过量叫做后带效应。

抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关。无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体，均可发现只有在两者分子比例合适时才出现最强的抗原-抗体反应。以沉淀反应为例，若向一排试管中加入一定量的抗体，然后依次向各管中加入递增量的相应可溶性抗原，根据所形成的沉淀物及抗原抗体的比例关系可绘制出反应曲线（图）：

前带、后带效应

从图中可见，曲线的高峰部分是抗原抗体分子比例合适的范围，称为抗原抗体反应的等价带（zoneofequivalence）。在此范围内，抗原抗体充分结合，形成的沉淀物最多，表明抗原与抗体浓度的比例最为合适，称为最适比（optimalratio）。在等价带前后分别为抗体、抗原过剩则影响沉淀物的形成，这种现象称为带现象（zonephenomenon）。带现象在临床检验中经常出现，特别是ELISA反应中。出现在抗体过量时，称为前带（prezone），出现在抗原过剩时，称为后带（postzone）。所以在临床工作中一定要注意前带和后带现象，以免出现假阴性结果，尤其以前带效应明显。

如何判断及解决钩状效应？免疫测定的实质是抗原抗体反应，抗原抗体反应是按一定的分子比例结合，当二者比例适中时，形成的免疫反应最强烈，形成复合物或检测的信号与所测的抗原或抗体成比例关系，但当抗原或抗体其中一者过量时，免疫反应将减弱，测定值呈现假性低值。

在化学发光中像二步分析法一般都能避免钩状效应，对于一步夹心法项目说明书中都提到了产生钩状效应的上限如人绒毛膜促性腺激素的钩状效应值是万mIU/ml.在实际工作中如遇到测定值与临床严重不符的结果要考虑到钩状效应，解决办法是稀释此样本。一步夹心法产生的钩状效应主要是抗原分子量的因素造成的，故采取稀释的方法是最可取的，但要注意稀释的方法和稀释液的选择。

以下引用（引自国际检验医学杂志）两例AFP实际发生的病例以帮助更好的理解（钩状效应即HOOK效应）

近十年来通过不断改进和发展，使化学发光免疫分析成为非放射标记免疫分析中最有前途的方法之一。测定时间短，无放射污染等特点，广泛应用在临床和科研。甲胎蛋白（AFP）是一种胚胎发育早期的高浓度血清糖蛋白，是早期诊断原发性肝细胞癌的特异性标志物，亦可用于妊娠时唐氏综合症的筛查及原发性肝细胞癌的预后判断和治疗检测。

在中国由于巨大的人口数量和较高的乙型肝炎病毒（HBV）感染率，原发性肝细胞癌的发病患者数约占世界的55%，死亡率为20.4/10万。因此，准确测定AFP一直受到临床医生的







































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